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DNA分光光度計如何測量濃度

更新時間:2023-04-10      點擊次數(shù):2033

提取DNA后,大多數(shù)實驗的下一階段需要已知濃度作為輸入材料。有許多方法可以測量DNA濃度,例如紫外線吸收,熒光染料和電泳。

DNA分光光度計通常用于測量濃度,本文將概述它們的工作原理以及使用原因。

DNA分光光度計的用途是什么?

分光光度法是一種重要的方法,用于一系列生化實驗,包括DNA,RNA和蛋白質(zhì)定量和質(zhì)量控制。在這些應(yīng)用中,樣品通常只能少量提供,最好進(jìn)行無損分析。使用微量分光光度計(有時稱為納米體積或納米滴分光光度計)可最大限度地減少樣品定量的使用,通常只需要 1μL 樣品。

DNA分光光度計如何工作?

分光光度法是電磁光譜學(xué)的一種形式,涉及定量測量材料的透射或反射特性作為波長的函數(shù)。DNA分光光度計使用檢測器記錄一定波長范圍內(nèi)的光束強度。

DNA分光光度計經(jīng)常用于紫外線,紅外線和可見輻射,但是,它們也可以詢問電磁光譜的許多其他元素。波長范圍(可以通過測試樣品傳輸?shù)念伾┦荄NA光譜儀的一個重要特征。此外,樣品透射百分比、樣品吸收的對數(shù)范圍以及偶爾的反射率測量百分比是某些應(yīng)用的重要特性。

在溶液中,DNA分光光度計可以測量堿基吸收的紫外線水平。DNA和其他核酸吸收峰值波長為260nm的光。吸收的光量與樣品中DNA的濃度成正比。濃度是使用比爾-朗伯方程根據(jù)透射光量計算的。為了用分光光度計定量DNA,應(yīng)將DNA懸浮在溶劑中,并且分光光度計應(yīng)用溶劑空白以校正任何背景吸光度。

分光光度計是極其精確、準(zhǔn)確和復(fù)雜的設(shè)備,可用作實驗室中的臺式或模型,或便攜式進(jìn)行現(xiàn)場工作。

DeNovix的DS-11系列在分光光度法領(lǐng)域具有革命性的性能。它結(jié)構(gòu)緊湊且易于使用,能夠提供具有熒光功能的全光譜紫外-可見分光度計分析,這意味著它非常適合快速核酸和蛋白質(zhì)定量。

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